當你每天在實驗室辛辛苦苦培養細胞，眼看著培養皿中細胞一天天茁壯成長，實驗即將進行的細胞活性分析。遺憾是一場突如其來的細菌污染卻讓一切功虧一簣，不得不重新開始實驗。由此可見，在細胞培養過程中，預防污染的重要性不容忽視。

  污染起源

  污染通常是由于微生物或支原體的存在造成的。至于細菌，文獻研究表明污染程度可達5%。這種污染很難檢測：視覺特征突然改變，發育中期出現渾濁或顏色改變。至于支原體，用肉眼檢測是不可能的。它們是最小的獨立生物體，但卻是大量污染的根源。

  細胞培養污染物可以分為化學污染和微生物污染。化學污染來源于非生命物質，例如培養基成分、水中的雜質或儲存過程中產生的降解產物。這些污染物會干擾細胞的正常生長和代謝。例如，革蘭氏陰性細菌細胞壁中的脂多糖（LPS），又稱為內毒素，是一種常見的化學污染物，即使在細菌死亡后仍然具有生物活性，能引起細胞培養物發熱反應。內毒素屬于熱原，熱原是能引起發熱的物質，包括LPS以及其他微生物產生的外毒素、病毒、真菌等。

  為了防止細胞培養污染，需要嚴格執行預防措施，包括但不限于：對設備進行徹底清潔和消毒；在生物安全柜等無菌環境中進行操作；使用無菌水和高質量的培養基；定期監測培養箱和水浴的溫度和清潔度；操作人員的規范操作和良好的無菌技術等等。

  細胞污染有什么影響

  細胞污染會對實驗研究產生一系列嚴重的影響：

  1.實驗結果失真：污染物會干擾細胞的正常生長和代謝，導致實驗數據失真，例如細菌代謝產物可能影響細胞活性，支原體污染可能導致假陽性結果，從而誤導研究結論。

  2.時間成本增加：污染不僅會浪費寶貴的實驗時間，還需要額外的時間進行污染鑒定、清除污染、恢復實驗，甚至可能需要從頭開始整個實驗。

  3.經濟損失：污染會導致細胞培養基、血清、培養瓶、移液器吸頭等試劑和耗材的損失，甚至可能損失珍貴的實驗動物或細胞株，造成經濟損失。此外，清潔、消毒和重復實驗也會增加人工成本。

  4.團隊合作和實驗室聲譽：人為錯誤是細胞污染的重要原因之一，例如操作不規范、缺乏經驗或溝通不暢。反復發生的污染事件會影響團隊的士氣，損害實驗室的聲譽，甚至可能影響研究項目的進展。”

  如何防止細胞培養污染

  至于支原體，有不同的測試可以在培養中檢測它們：特定培養測試、DNA比色測試或PCR檢測測試。

  然而，最好的策略是預防、早期發現和消除所有受感染或潛在受感染的物質。

  為了降低微生物污染風險，處理在無菌環境中進行。

  改進工藝以降低農作物污染風險的方法包括：

  1.減少所準備的培養基數量，以避免其因受熱或亮度而發生降解……

  2.使用合適的產品對孵化器和其他儀器進行消毒

  3.使用質量水平與細胞培養兼容的設備：不含DNA、不含RNase、不含DNase、不含內毒素……–

  4.確保環境清潔（灰塵、蜘蛛也會造成污染）

  5.避免存放紙板箱，因為只要有一點濕度，霉菌就會非常喜歡紙板箱

  綜合上述，細胞培養要有預防意識，細胞培養要確保處于無菌環境，設備及時進行消毒、保持實驗室環境清潔，避免亂堆放紙板箱等。積極做好細胞培養預防工作，可以極大提高細胞培養工作效率，獲得良好的細胞培養成果。