酶聯免疫吸附測定(ELISA) 抗體是用于研究蛋白質的 ELISA 測定的關鍵要素。在繼續了解抗體作用之前，有必要了解有關 ELISA 測試的更多信息。

  ELISA 是實驗室最常用的檢測方法之一，用于檢測和定量分析可溶性物質，例如肽、抗體和激素。它也稱為酶免疫分析 (EIA)。

  ELISA 測定的工作原理是特異性抗體和抗原相互作用。它包括將抗原固定在固體表面上，然后將其與附著在報告酶上的抗體復合。然后，使用不同的檢測方法，通過與適當的底物一起孵育來測量報告酶活性。

  然而，如今已經開發出不同類型或形式的 ELISA 檢測，其中包括：

  1、直接ELISA

  2、間接ELISA

  3、夾心ELISA

  4、競爭性ELISA

  但是，它們都遵循相同的基本步驟，包括：

  1、添加捕獲抗體：將吸附的捕獲抗體（與 ELISA 板結合）和含有特定抗原的樣品添加到孔板中。

  2、清洗步驟：清洗微孔板孔以去除未結合的物質，僅留下要檢測的抗原。

  3、添加檢測抗體：酶聯檢測抗體與目標抗原的不同表位結合。

  4、清洗步驟：再次清洗微孔板以去除未結合的抗體。

  5、檢測：涉及使用合適的檢測方法（例如化學發光、顯色、比色和熒光測定）對復合物進行可視化。辣根過氧化物酶 (HRP) 和堿性磷酸酶 (ALP) 是兩種最常用的底物，它們與酶結合以產生信號。  

  6、讀板：酶標儀檢測有色反應產物并計算光密度 (OD) 值，從而了解每個樣本中存在的抗原量。

  ELISA 反應的分析之所以成為可能，主要是因為抗原和抗體之間的強力相互作用。并且，本文上海通蔚生物詳細介紹了 ELISA 抗體、其功能、在 ELISA 方法中的作用以及在工業中的應用。

  ELISA 抗體：它們是什么及其類型？

  ELISA 抗體抗體與特定抗原配對，有利于研究不同樣品中分子的特定蛋白質。

  根據定義，抗體是為生物體提供針對細菌和病毒（稱為抗原）等外來入侵者的免疫力的蛋白質。抗體也稱為免疫球蛋白 (Ig)。

  抗體的四種多肽各有兩條輕鏈和兩條重鏈。在 ELISA 中，抗體根據是否直接結合抗原或另一種抗體進行分類：

• 一抗：與目標抗原特異性結合的抗體

• 二抗：標記的二抗與一抗結合

  這些抗體也稱為匹配抗體對。為了減少 ELISA 反應過程中的背景噪音并產生有效的結果，建議使用抗體的稀釋液。

  如今，許多公司提供即用型 ELISA 試劑盒，其中包含合適的試劑，用于檢測各種分子，如趨化因子、細胞因子和生長因子。

  一抗

  一抗直接與固定在孔板表面的特定抗原結合。

  為了產生一抗，需要一種宿主物種，例如兔子、小鼠、山羊或雞。在生產的第一步中，宿主將針對抗原進行免疫，產生一抗。

  二抗

  二抗與抗體-靶蛋白復合物結合。它通常帶有標記，有助于檢測目標抗原。具體來說，這種類型的測定對于通過信號放大分析少量存在的特定蛋白質的數量至關重要。

  通過將一抗注射到另一種宿主中來產生二抗。例如，如果一抗是在小鼠中產生的，則二抗可以在山羊、兔子或雞中產生。

圖：一抗和二抗的表示

  一抗和二抗都可以是單克隆抗體或多克隆抗體。

  單克隆抗體

  單克隆抗體是由單一親本細胞中產生的相同 B 細胞克隆產生的同質抗體群。它僅與特定抗原的單個特定表位相互作用。

  圖：單克隆抗體的生成。

  多克隆抗體

  多克隆抗體是體內不同 B 細胞克隆產生的異質抗體群。它們可以識別并結合單一抗原上的多種表位。

  圖：多克隆抗體的生成

  抗體如何與免疫測定一起使用？

  免疫測定是生命科學實驗室中使用的強大技術，用于研究蛋白質、測量給定樣品中蛋白質的含量，并分析蛋白質在生物體中的功能和定位。它們的工作原理是特異性抗原-抗體相互作用。

  檢測抗原抗體相互作用的兩種免疫測定包括：

• 直接免疫測定：在該測定中，酶聯一抗與靶抗原結合。這種抗原-抗體相互作用激活信號分子進行檢測。

• 間接免疫測定：一抗與靶抗原結合。然后，酶綴合的二抗與一抗結合以檢測相互作用。通常，該反應還使用生物素-鏈霉親和素復合物來放大信號。

  ELISA 抗體有什么用途？

  ELISA 抗體在免疫學和生命科學實驗室中有廣泛用途。下面列出了一些應用：

• 一抗可用于檢測許多疾病的疾病生物標志物，例如糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病。然而，為了確認診斷并識別假陽性，研究人員需要進行蛋白質印跡分析。

  此外，一抗還應用于多種治療劑的分布、代謝、吸收和排泄。  

• 二抗在一系列工作流程中具有深遠的用途，包括 ELISA、蛋白質印跡、免疫組織化學、免疫染色和免疫細胞化學。