ELISA是實驗室里一項最基本的免疫檢測技術，被廣泛應用科研、醫療、食品和環境等領域。面對市場琳瑯滿目試劑盒及數百家供應商，對于剛進入實驗室的新手或者準備開展ELISA實驗人員，如何選擇一款合適的ELISA試劑盒呢？下面我們從elisa類型、實驗物種及待檢樣品、樣品中檢測物水平、樣本可獲得性、試劑盒關鍵性技術參數和預算。

  目錄：

  1.ELISA類型

  2.實驗物種及待檢樣品

  3.樣品中檢測物水平

  4.樣本可獲得性

  5.試劑盒關鍵性技術參數

  6.預算

  一、ELISA類型

  在進行ELISA實驗時，首要是明確ELISA類型。實驗人員可以結合自己待檢測物來明確試劑盒類型。一般試劑盒類型分為直接法、間接法、競爭法和雙抗體夾心法。下面詳細介紹：

  1.直接法：直接ELISA步驟最少，常用于分析對抗原的免疫反應。

  2.間接法:間接ELISA是一個兩步過程，最適合確定樣本中的總抗體濃度。

  3.夾心ELISA（適用于大蛋白）利用匹配的抗體對，靈敏度比間接或直接ELISA高2-5倍。用于分析復雜樣品，因為抗原在測量前不需要純化。

  4.競爭性ELISA（適用于小蛋白質）最適合檢測不能被兩種不同抗體結合的小抗原，例如夾心ELISA技術。

  二、實驗物種及待檢樣品

  如果實驗對象是人、小鼠及大鼠比較常見物種，選擇一個合適的試劑盒相對容易一些。如果檢測樣品比較稀有的雞、牛、猴物種，市面上還是比較少。如果需要的話，最好要對待檢物（如有種屬差異性）進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應數據。

  對于樣品類型而言，一般的商業化試劑盒在正式上市銷售之前都經過血清、血漿和細胞培養上清液的驗證。

  在選擇試劑盒之前，最好是詳細閱讀說明書。因為在某些情況下樣品會存在感染因素。例如溶血血漿、含有高脂肪的樣本、細胞培養液或人抗屬抗體中含有胎牛血清等。通過閱讀供應商說明書或直接進行咨詢。如果您的樣品為組織和細胞裂解物，則需要謹慎的選擇試劑盒。

  三、樣品中檢測物水平

  為了降低目標蛋白之外的其他成分（例如鹽離子、脂類、其他蛋白質等），一般建議至少進行2倍稀釋，也就是將1份樣品與1份稀釋液混合。如果對樣品濃度范圍沒有概念，最好先做預實驗，測試不同稀釋倍數下的結果，找到最佳稀釋倍數。除此之外，樣品中待檢測物含量遠超試劑盒檢測范圍（標曲范圍），需要根據樣品中目標蛋白的大概濃度和試劑盒的檢測范圍，選擇合適的稀釋倍數。最后計算結果時，需要將測得的數值乘以相應的稀釋倍數，才能得到樣品中目標蛋白的真實濃度。

  四、樣本可獲得性

  一般而言，商業化試劑盒的樣本用量都在50ul或100ul，但也有一些供應商的試劑盒樣品用量要求可少至于10ul。如果您待檢測樣品比較難獲取，則需認證考慮試劑盒對樣品用量的需求。如果樣品本身就比較少，且需要做多因子檢測時更需要謹慎選擇。

  五、試劑盒關鍵性技術參數

  ELISA試劑盒關鍵的技術參數包括板內差異性、板間差異性、批間差異性、重復性、特異性及交叉反應性、回收率等。如果經常開展ELISA實驗，建議使用同一廠家試劑盒，這樣可以保證實驗數據的可比性和重復性。

  六、預算

  預算是選購ELISA試劑盒比較關鍵的環節。國際公認知名品牌（進口試劑盒）質量比較可靠，文獻引用較多。由于知名品牌（進口）運輸成本較高，試劑盒價格也較高。對于國內優質品牌試劑盒也是不錯的選擇，因因省去不少物流和報關中間費用，與進口試劑盒價格上相比也有較大的優惠，而且能夠提供靈活的包裝規格，比較適合國情。

  以上就是通蔚為大家介紹ELISA試劑盒選擇方法，廣大科研人員選擇試劑盒務必仔細研究，謹慎購買。如果您對ELISA試劑盒還有疑問，歡迎前來咨詢通蔚試劑盒顧問。