在實驗室進行細胞培養時總會添加胎牛血清，英文縮寫為“FBS”。自從您開始進行細胞培養是不是經常使用它呢？本文為您想寫介紹下關于FBS的基礎信息，例如“FBS到底是什么？主要產地在哪里？成分是什么？需要批次檢查嗎？為什么要滅活？滅活真的有必要嗎？FBS的加工類型有很多，它們之間有什么區別？”

什么是FBS?

FBS的正式名稱是“FetalBovineSerum”，即胎牛血清。胎牛血清在免疫系統被激活之前，被廣泛用作培養基的添加劑，因為它含有少量的丙種球蛋白，會影響細胞增殖。這就是我們使用胎牛血清的原因。然而，由于牛胎兒的供應不穩定且難以控制，FBS的價格波動是不可避免的，這是問題之一。

FBS來源

FBS來源分布在FBS的主要生產國有以下國家澳大利亞、新西蘭、美國、加拿大、墨西哥、智利、烏拉圭、巴西（部分地區無法進口）、哥倫比亞、法國、西班牙和荷蘭等。

FBS成份

FBS是一種復雜的混合物，包含多種支持細胞生長和增殖的營養物質和因子。其主要成分包括：

1、蛋白質:例如白蛋白、球蛋白等，提供氨基酸以及維持滲透壓。

2、生長因子:例如IGF、TGF、FGF、EGF等，刺激細胞增殖和分化。

3、激素:例如胰島素、生長激素等，調節細胞代謝和生長。

4、脂質:提供能量和構成細胞膜的成分。

5、碳水化合物:提供能量來源。

6、維生素和微量元素:參與各種細胞代謝過程。

7、未完全鑒定的生長因子和營養物質:對細胞培養有重要作用，但其具體成分和功能仍在研究中。

除了這些有益成分外，FBS也可能包含一些潛在的負面因素，例如：

1、補體系統:可能導致細胞裂解和損傷。

2、內毒素:可能影響細胞生長和功能，并引發炎癥反應。

由于FBS來源于動物血液，其成分含量會因批次和個體差異而有所不同，因此進行批次檢測至關重要，以確保FBS的質量和穩定性。FBS中的蛋白質和碳酸氫鹽等成分也會影響培養基的緩沖能力，使其pH值更穩定。

FBS批次檢查-真的有必要嗎

由于FBS來源于動物血液，其成分含量受個體差異和生產批次的影響，因此不同批次FBS的成分組成存在差異是不可避免的。盡量減少批次間差異對于保證實驗結果的可重復性至關重要。

雖然不同實驗室的標準操作程序(SOP)不同，但進行FBS批次檢測通常是必要的，尤其是在以下情況下：

細胞對血清成分變化敏感：可以通過預實驗比較不同批次FBS對細胞生長、形態、功能等指標的影響來評估細胞的敏感性。一些對血清敏感的細胞類型，例如原代細胞和一些細胞系，需要更嚴格的批次檢測。

需要長期培養或進行重復性實驗：為了保證實驗結果的一致性和可比性，建議在長期實驗或重復性實驗中使用同一批次的FBS。

進行關鍵實驗或需要高度可重復性的實驗：例如藥物篩選、基因表達分析等，批次差異可能會對實驗結果產生顯著影響。

進行批次檢測時，建議從供應商處獲取多個批次的FBS樣品，并進行小規模的預實驗，比較不同批次FBS對細胞的影響，選擇最合適的批次用于正式實驗。即使是單次實驗，也建議盡量選擇經過驗證的、質量穩定的FBS，以提高實驗結果的可靠性。記錄所用FBS的批號，以便后續追蹤和比對。

FBS滅火是否有必要？

FBS滅活(HeatInactivation,HI)通常指將FBS在56°C水浴中加熱30分鐘，以去除補體活性。建議使用帶有溫度控制功能的搖床水浴，以確保受熱均勻，避免局部過熱。需要注意的是，切勿將冷凍的FBS直接放入水浴中，以免瓶子因溫差過大而破裂。應先將FBS在冰箱中緩慢解凍，然后進行滅活。

FBS滅活的主要目的是去除補體活性，從而防止補體介導的細胞損傷。然而，熱處理也可能影響FBS中其他一些成分，例如某些生長因子和激素，從而影響細胞的生長和功能。一些研究表明，FBS滅活可能會對某些實驗，例如免疫學實驗、細胞分化實驗等，產生影響。因此，是否需要滅活FBS應根據具體的細胞類型、實驗目的和參考文獻進行綜合考慮。

在同一系列實驗中，應該保持FBS的處理方式一致，以確保實驗結果的可比性。如果決定滅活FBS，建議在滅活后立即將其分裝成小份，并儲存在-20°C或更低溫度下，避免反復凍融。記錄滅活的日期和時間，并注明FBS的批號和滅活狀態。

一些實驗室認為常規的FBS滅活是不必要的，尤其是在使用高質量、經過嚴格篩選的FBS時。他們認為，現代FBS的生產工藝已經能夠有效控制補體和其他潛在有害成分的含量，因此無需進行額外的熱處理。最終是否需要滅活FBS，需要根據實驗室的具體情況和實驗需求進行判斷。查閱相關文獻和咨詢經驗豐富的研究人員，可以幫助做出更明智的決定。

FBS滅火方法有哪些？

熱滅活胎牛血清

通過滅活FBS，使FBS中所含的補體失活，防止培養過程中補體系統激活所造成的細胞損傷。然而，有些細胞的失活會影響數據和培養結果，因此需要仔細考慮。

γ射線輻照胎牛血清

用伽馬射線處理FBS來滅活FBS中存在的病毒。它可用于病毒污染成為問題的情況，例如再生醫學研究。

活性炭剝離胎牛血清

該FBS已使用活性炭去除了激素和脂溶性物質。它可用于受激素影響的細胞實驗系統。

不含四環素的FBS

這是用于在存在或不存在四環素（或其衍生物強力霉素；Dox）的情況下調節基因表達的系統（Tet-On、Tet-Off）的FBS。即使產品是“不含四環素”的，由于檢測限的原因，也不可能完全去除四環素，但每家公司都制定了自己的標準，并將四環素含量低于一定水平的產品作為不含四環素的產品進行銷售。或者它可能被作為“四環素測試”出售。

透析胎牛血清

該FBS已通過分餾處理，以消除低于標準MWCO的小分子。用于必須考慮低分子量物質影響的實驗系統。

外泌體耗盡的FBS

這是涉及外泌體的實驗中使用的FBS。用于必須考慮FBS衍生的外泌體（及其所含核酸）的影響的實驗系統。

ES細胞篩選FBS

制造商已確認該FBS可以維持ES細胞處于未分化狀態。這減少了研究人員自己進行測試所需的精力和成本。我們還提供干細胞篩選的FBS。

IgG耗盡的FBS

由于IgG從未被完全去除，因此有時被稱為“低IgG”FBS。它用于雜交瘤培養以產生抗體、蛋白質純化以及需要IgG細胞毒性的實驗系統。

購買FBS時需要檢查什么？

購買時應注意以下幾點：

1、內毒素濃度

2、血紅蛋白濃度

3、過濾器除菌次數及過濾器孔徑

4、原產地

FBS的價格主要取決于這些因素。一般來說，內毒素和血紅蛋白含量越低，滅菌越徹底，價格往往越高。此外，產品名稱可能會根據質量而改變。

至于原產國，如果FBS來自大型制造商，通常不會有問題，因為它在進口前已經（應該）經過了適當的動物檢疫。

FBS常見現象及常見問題

有時您可能會對所購買的FBS有點擔心。以下是一些最常聽到的問題的總結：

1、我看到我的FBS中有沉淀物或白色線狀物......

解凍后，FBS可能會含有冷凍時不明顯的沉淀物或白色細絲。這些是血清中所含的“纖維蛋白”和脂蛋白。一般來說，這不會影響細胞培養，但如果您擔心，請小心使用FBS以避免污染，或在使用前使用過濾滅菌。

2、紅色比其他批次和其他制造商更深......

FBS的顏色隨血清中血紅蛋白的含量而不同。通常情況下，血紅蛋白含量的差異不會影響FBS的性能，但如果您擔心，我們建議您聯系制造商（進口商）。

3、解凍后的FBS可以分裝后重新冷凍嗎

這取決于制造商。一些制造商表示溶液在分裝后可以重新冷凍，但根據個人經驗，我建議解凍后將其存放在冰箱中并盡快使用。畢竟，它是活生生的生物……

FBS作為細胞培養中不可或缺的成分，其選擇和使用對實驗結果有著至關重要的影響。從了解FBS的來源、成分、批次差異、滅活方法以及不同處理類型的特點，到掌握關鍵的購買注意事項，科研人員才能更好地控制實驗變量，提高實驗的可重復性和可靠性。