在實驗室里，我們常會看到這樣的現象，培養細胞時幾乎總是添加FBS（胎牛血清）。或許您會問“什么是胎牛血清，它有什么用途？”接下來文章通蔚生物帶大家聊聊“FBS”。

為什么要在培養基中添加血清

動物細胞不能單獨在培養基中生長，必須補充血清。血清作為激素來源，增強培養基的緩沖作用，并防止酚紅和各種蛋白酶的侵害。近年來，許多研究人員致力于尋找血清的替代品，例如無血清培養基和合成培養基。雖然無血清培養基在不斷發展，但血清仍然是許多動物細胞培養中不可或缺的一部分。作為科研人員需要根據具體的研究需求選擇最合適的培養方法，并根據細胞類型和實驗目的來決定是否使用血清或無血清培養基。

為什么經常用胎牛血清

理想情況下，人體細胞使用人血清，小鼠細胞使用小鼠血清，因為同種血清能提供更適合該物種細胞生長的營養和生長因子。然而，由于成本和倫理等原因，這些血清很難獲得。在實際應用中，商業細胞培養中經常使用胎牛血清（FBS），因為它富含營養，能夠支持多種細胞類型的生長。

什么是胎牛血清？胎牛血清的成分有哪些？

胎牛血清（FBS）是從胎牛的血液中提取的，通常來自胎牛的心臟或臍帶。在血液自然凝固后，通過離心去除細胞和血凝塊，從而得到血清。血清中保留了血漿中的大部分蛋白質、激素和生長因子，這些成分對于細胞培養至關重要。

雖然胎牛血清已去除細胞和凝血因子，但仍留有許多有助于細胞生長的成分，包括：

1.粘附因子：促進細胞附著到培養基表面，從而提供細胞生長的支撐。

2.生長因子：如表皮生長因子（EGF）、胰島素樣生長因子（IGF）等，刺激細胞分裂和生長。

3.激素：如胰島素、類固醇激素，調節細胞代謝和功能。

4.脂質：包括脂肪酸和膽固醇，支持細胞膜結構和功能。

5.鋪展因子：幫助細胞在培養基表面鋪展，促進細胞分裂和擴展。

6.糖類：如葡萄糖，為細胞提供能量。

7.轉運蛋白：如白蛋白，幫助運輸營養物質和維持細胞滲透壓。

5.維生素：如維生素A、維生素D，參與細胞代謝和功能調節。

胎牛血清有什么用途？

在許多領域，細胞培養基的生長被認為非常重要，例如生物技術、疫苗生產、克隆和體外受精。胎牛血清在適當的濃度下使用，可以滿足細胞培養物的特定代謝要求，并因其高含量的激素、載體蛋白和大分子蛋白而促進細胞生長。例如胚胎干細胞通過使用胎牛血清轉移到培養基中，能夠顯著促進其生長。

當今市場上的許多疫苗都是使用胎牛血清作為細胞培養基生產的。例如，用于預防病毒的疫苗通常利用胎牛血清進行生產。最近，在生物技術領域進行的一些克隆動物組織的實驗中，經常使用胎牛血清。

胎牛血清怎么提取和加工？

就像細胞培養中使用的大多數其他動物血清一樣，胎牛血清是由從商業屠宰場收集的血液制成的。胎牛血清生產的第一步是在封閉和隔離的環境中從牛胎兒中采集血液。在屠宰過程中，對牛胎兒進行心臟穿刺，從已宰殺的母牛體內取出胎兒后，通過心臟穿刺抽取血液。血液被冷藏以使其自然凝固。

然后，利用離心機從凝固的血液中去除纖維蛋白凝塊和剩余的血細胞，得到澄清的黃色（稻草色）血清。第二步是過濾處理，采用三重無菌0.1微米濾膜的過濾鏈進行過濾。處理后，滅菌的胎牛血清由信譽良好的商業血清供應商進行嚴格的質量控制測試。如果血清通過了質量控制測試，則會提供詳細的分析證書。

雖然血清采集過程比較簡單，雖然過濾孔可以去除真菌和細菌，但它們無法根除病毒。每批都要經過病毒檢測，從而使所含的病毒失活，其檢測方法如下：

1、熱滅活胎牛血清

這是經過上述加熱滅活處理的FBS。通過滅活胎牛血清中所含的補體，可以防止培養過程中補體系統激活引起的細胞損傷。另一方面，有些細胞的數據和培養結果可能會因失活而受到影響，所以要慎重考慮。

2、γ-輻照胎牛血清

用伽馬射線處理胎牛血清可滅活胎牛血清中的病毒。它可用于存在病毒污染問題的情況，例如再生醫學研究。

3、活性炭處理（木炭剝離）FBS

使用活性炭去除激素和脂溶性物質的胎牛血清。它可用于涉及受激素影響的細胞的實驗系統。

4、不含四環素的胎牛血清

不含四環素的胎牛血清是指胎牛血清中不含有抗生素四環素（tet）。四環素是一種常用的抗生素，有時會在胎牛血清的生產過程中被添加以防止細菌污染。然而，在某些特定的生物學實驗和細胞培養中，四環素可能會干擾實驗結果或影響細胞的生長和行為。因此，需要使用不含四環素的胎牛血清。盡管號稱“不含”，但由于檢測極限，不可能完全去除，但各公司都制定了標準，將含有低于一定標準的四環素的產品作為四環素進行銷售。因此，在購買這種血清要留意一下。

5、透析胎牛血清

這是通過分餾處理不含低分子的胎牛血清，其MWCO低于標準MWCO。用于需要考慮低分子物質影響的實驗系統。由于透析過程會去除一些低分子量物質，這可能會降低透析胎牛血清對某些細胞系的生長促進能力。因此，在使用透析胎牛血清時，需要根據實驗的具體需求和細胞的特性進行選擇和調整。

6、外泌體耗盡的FBS

FBS用于與外泌體相關的實驗系統。用于需要考慮FBS衍生的外泌體（以及其中包含的核酸）影響的實驗系統。因此在使用外泌體耗盡的FBS時，需要根據實驗的具體需求和細胞的特性進行選擇和調整。

7、ES篩選的FBS

該FBS已被制造商確認可維持ES細胞處于未分化狀態。研究人員可以減少自己測試的工作量和成本。

8、IgG耗盡的FBS

由于IgG永遠不會被完全去除，因此有時被稱為“低IgG”FBS。它用于在抗體生產、蛋白質純化和需要考慮IgG細胞毒性活性的實驗系統過程中培養雜交瘤。

如何保存胎牛血清？

1、儲存和保質期

除非標簽上另有說明，否則所有胎牛血清產品應儲存在-20°C或以下的環境中。研究表明，在這些條件下，血清產品可保存長達五年，而幾乎沒有或沒有有害影響。請勿使用無霜或自動除冰型冰箱，因為這些冰箱的溫度波動可能會損害血清的質量。每個產品都貼有儲存說明標簽。

2、解凍分裝

快速解凍胎牛血清產品，優選使用37°C的水浴。玻璃瓶在放入水浴之前應在室溫下放置一小時，以免因溫度驟變而破裂。請勿反復冷凍和解凍血清產品，這會導致血清中的多種活性成分降解。

有時，血清中可能會出現脂質和/或鈣顆粒，這并不意味著血清的無菌性或性能存在問題。建議將血清等分到無菌的冷凍容器中，并重新冷凍，以便在需要時解凍使用。

購買FBS時需要注意的事項

購買FBS時，請注意以下幾點：

1.內毒素濃度：

內毒素是細菌細胞壁的成分，過高的內毒素濃度可能會對細胞培養產生不良影響。選擇內毒素濃度低的FBS，以確保細胞培養的健康和實驗結果的可靠性。

2.血紅蛋白濃度：

血紅蛋白是紅細胞破裂后釋放到血清中的成分。較高的血紅蛋白濃度可能表明血清的質量較低。選擇血紅蛋白濃度低的FBS，有助于獲得更純凈的培養基。

3.過濾器滅菌時間和過濾器孔徑：

過濾器的滅菌時間和孔徑直接影響到FBS的無菌性。通常使用0.1微米或0.2微米的過濾器進行無菌過濾，以去除微生物和顆粒。了解過濾過程的詳細信息可以幫助確保產品的無菌性。

4.原產地：

不同地區生產的FBS質量可能有所不同。了解產品的原產地，可以幫助評估其質量和可靠性。

胎牛血清的價格主要取決于以上因素。一般來說，內毒素濃度越低、血紅蛋白濃度越低、滅菌越徹底，價格越高。產品名稱和等級也可能根據質量和處理方式而有所不同。

5.其他考慮因素

供應商的信譽：選擇信譽良好的供應商，可以確保產品的質量和一致性。

批次間一致性：了解供應商是否能夠提供批次間一致的產品，以確保實驗結果的可重復性。

分析證書（CoA）：在購買前索取并查看產品的分析證書，確保其符合實驗需求。

通過考慮這些因素，可以選擇到高質量的FBS，確保實驗的成功和數據的可靠性。

關于原產國，如果是來自大生產商的FBS，我認為沒有問題，因為動物在進口前已經經過徹底檢查，血清的主要生產地包括：

澳大利亞

新西蘭

美國

加拿大

墨西哥

智利

烏拉圭

巴西（*根據地區的不同，無法進口）

哥倫比亞

法國

西班牙

荷蘭

通蔚生物胎牛血清，源于優質的胎牛來源，經過嚴格的篩選和處理，確保每一滴血清都達到最高的質量標準。胎牛血清采用先進的生產工藝，確保血清中的營養成分和生長因子得到最大程度的保留，為細胞提供最優質的生長環境。

通蔚生物胎牛血清都能為您的實驗提供穩定的支持。其高濃度的生長因子和豐富的營養成分，有效促進細胞的生長和分化，讓您的實驗成果更加顯著。