40多年來，免疫測定法一直應用于醫療保健行業、實驗室醫學和科學研究，豐富了人類和動物的生活。臨床免疫測定測試增強了治療選擇，減少了患者住院時間并減輕了疾病的嚴重程度。

  在生命科學領域，免疫測定通過監測各種蛋白質、激素和抗體在研究生物系統方面發揮著至關重要的作用。在商業領域，免疫測定有多種用途，包括檢測食品和水中的毒素以及對制造過程中使用的特定分子進行質量控制監測。

  在商業領域，免疫測定測試用于各種目的，包括檢測食品和水中的毒素以及制造過程中使用的特定分子的質量控制監測。

  本文上海通蔚生物將為大家介紹免疫測定試劑盒的各個方面、其工作原理及其用途。

  什么是免疫測定？

  免疫測定是一種分子檢測測試，由于其速度快、可靠性高，因此既可用于現場，也可用于實驗室。免疫測定依賴于抗體與分子獨特結構結合的天然能力，以確保準確性。因此，它們對于定制抗體生產服務很有價值。動物在檢測到病原體存在時就會產生抗體和蛋白質。抗體可能存在于體液中，包括血液和組織液，它們可以在與抗原接觸時與抗原結合。

  抗體之所以特殊，是因為它們只與目標抗原或分析物結合，這是通過根據抗原的三維框架定制定制抗體來實現的。一旦從人體血液中分離出來，純單克隆和多克隆抗體就可以作為高精度測試試劑，用于監測目標分子，同時最大限度地減少周圍化合物和化學物質的干擾。

  免疫測定測試的工作原理

  抗體可用于免疫測定測試，以識別血液和其他體液中低濃度的生物標志物。這種方法使抗原與新引入的特定抗體結合，產生免疫反應。這指的是選擇性；抗體的目標范圍很窄，只與目標分析物結合。免疫測定可以利用抗原和抗體之間的相互作用，用清潔試劑檢測分析物。當目標分析物存在時，就會發生顏色變化。所見的顏色代表測試液中目標化學物質的濃度。

  免疫測定類型

  1.蛋白質印跡法(WB)

  通過電泳根據給定生物樣本中的蛋白質大小進行分離，然后將其轉移到膜上并用特定抗體染色。利用該技術，除了檢測感興趣的蛋白質外，還可以確定其大小、確認是否存在翻譯后修飾或比較不同樣本中的濃度等。

  2.免疫沉淀(IP)

  通過抗原-抗體復合物的沉淀從樣品中存在的其他成分中分離出某種蛋白質。除了檢測和定量蛋白質外，其應用非常廣泛，包括確定某種抗原的分子量、研究蛋白質之間的相互作用或監測翻譯后修飾。

  3.放射免疫分析（RIA）

  使用放射性同位素標記抗原抗體復合物。隨后，讀取放射性來檢測復合物并確認和量化樣本中目標蛋白質的存在。放射免疫分析法的優點之一是它是一種高靈敏度的技術，可以檢測出樣品中濃度極低的蛋白質。然而，它也有一個很大的缺點，那就是使用放射性物質存在潛在的危險。

  4.ELISA（酶聯免疫吸附測定）

  在不同類型的免疫測定中，ELISA因其易于實施、多功能性以及高靈敏度和特異性而成為研究實驗室中最流行和最常用的方法之一。它基于酶的使用，通過添加相應的底物催化比色反應，可以檢測抗原-抗體連接（從而檢測樣品中是否存在某種抗原）。

  5.CLIA(化學發光免疫分析)

  化學發光測定或CLIA與ELISA的原理相同，不同之處在于，在這種情況下，抗原-抗體結合是通過化學反應產生的熒光來測量的。CLIA檢測的缺點是需要特定的設備來讀取熒光，但另一方面，它們的優點是靈敏度明顯高于傳統的ELISA。

  6.免疫熒光（IF）

  在免疫熒光測定中，利用熒光團可以通過與特定抗體的結合來檢測目的抗原。

  7.免疫組織化學(IHC)

  結合了免疫學、生物化學和組織學技術，通過使用特異性抗體來檢測組織切片中存在的抗原。此外，它還可以可視化所研究組織內抗原的分布和位置。

  8.免疫細胞化學（ICC）

  這是一種與免疫組織化學具有相似基礎的技術，只是在這種情況下，免疫細胞化學可以檢測細胞內的抗原。IHC和ICC的靈敏度略低于ELISA或WesternBlot，但它們允許在完整細胞或組織的背景下研究抗原，而無需事先將其分離。

  9.流式細胞術（FC）

  在各種免疫測定方法中，流式細胞術是最復雜的方法之一。流式細胞術是一種測量激光光束散射和反射的方法，根據細胞的物理化學特性對懸浮液中的細胞進行計數和分析。

  免疫測定有哪些應用？

  免疫測定法因其操作簡單而廣為使用。以下是免疫測定法的一些常見應用。

  1.臨床診斷和用藥監督

  免疫測定在多種疾病的診斷和治療中發揮著重要作用。免疫測定用于癌癥診斷、妊娠檢測和治療藥物監測，以及定制肽合成等其他應用。這些生物分析測定可以評估用于治療癌癥和艾滋病毒的處方藥的療效。此外，它們還用于工作場所的藥物檢測領域。

  2.生物制藥分析

  “生物制藥”是指使用生物過程或材料衍生、生產或創造的藥物和生物試劑。免疫測定是生物制藥研究和開發的有益工具，例如細胞療法、基因合成和疫苗。

  3.食品分析

  在生產食品和開發新食譜時，免疫測定測試經常用于識別潛在的有害污染物或過敏原。例如，免疫測定測試可以篩查麩質、危險化合物、重金屬中毒或大腸桿菌等病原體。

  4.食物過敏原檢測

  這種檢測至關重要，因為食物引起的過敏反應可能是致命的。有些人的免疫系統對某些食物中的蛋白質反應異常，導致一種稱為食物過敏的疾病。涉及免疫球蛋白的細胞介導和抗體介導反應都會引起癥狀。牛奶、雞蛋、杏仁、芝麻、小麥和甲殼類動物是常見的過敏食物，可以使用家庭和工作場所提供的眾多免疫測定試劑盒之一進行檢測。

  從生產設備中取出的拭子和對成品食品的測試可用于確定是否存在交叉污染，并確保企業遵守法律法規。食物過敏者可以提供人類IgE進行免疫學測試，而多克隆或單克隆動物抗血清可以提供動物IgG和IgY。雖然單克隆抗體被設計成僅識別一種蛋白質或肽，但多克隆抗血清是針對一組蛋白質產生的。

  點免疫印跡法或SDS-PAGE可用于定性鑒定食物過敏原，而Rocket免疫電泳法和ELISA可用于定量鑒定隱藏的食物過敏原。點免疫印跡法也是一種定性檢測食物過敏原的方法。ELISA用于鑒定完整的蛋白質，但某些ELISA無法檢測蛋白質水解物。由于親脂性殘留物很難定位，因此被稱為免疫測定ELISA的殘留檢測方法需要進行重大開發。

  5.霉菌毒素分析

  霉菌毒素是天然存在的毒素，由特定霉菌產生。它們對人類健康有害，對消費者構成威脅。黃曲霉毒素、赭曲霉毒素A、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮和伏馬毒素等毒素都屬于此類有害物質。

  如果儲存不當，玉米、小麥、大米、燕麥、黑麥、大豆、堅果、水果和香料等農產品都可能被霉菌毒素污染。此外，霉菌毒素在收獲和干燥之前可能會進入食品和飼料中。基于免疫測定技術的霉菌毒素檢測技術問世已有十多年。直接競爭性ELISA測試是檢測霉菌毒素最流行的免疫測定程序。

  6.環境監測

  近年來，免疫測定法已進入環境科學領域。免疫測定法有助于檢測環境污染物。例如，免疫測定法可檢測地下水和地表水中的各種有害物質，如PCB（多氯聯苯）、某些殺蟲劑等。

  免疫測定測試有哪些優勢？

  由于其實用性，抗體免疫測定已變得很普遍。使用抗體或免疫測定的方法包括：

  1.經濟

  2.可靠的

  2.足夠靈敏，可以檢測到微量分子

  4.適用于多種化學工藝和工業用途

  免疫測定可以識別常規程序無法檢測到的低濃度重要抗原。免疫測定通常快速而精確，使臨床醫生能夠可靠地診斷各種疾病，包括糖尿病、癌癥和心血管疾病。