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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ：人臍帶血單核細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：臍帶血
產品規格 ：5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人臍帶血單核細胞分離自臍帶血。臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發現，臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統的造血干細胞，可用于造血干細胞移植，因此，臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。
臍帶血中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體。這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發揮積極作用。
血液中的單核細胞來源于骨髓干細胞分化出的髓樣干細胞，是機體防御系統的一個重要組成部分。單核細胞能吞噬異物產生抗體，在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。機體發生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數百分比發生變化，因此，檢查單核細胞計數成為輔助診斷的一種重要方法。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人臍帶血單核細胞采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人臍帶血單核細胞經C D 14免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：半貼壁半懸浮
細胞形態 ：圓形、巨噬細胞樣
傳代特性 ：不增殖。不傳代
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
人臍帶血單核細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人臍帶血單核細胞是一種半貼壁半懸浮細胞，細胞形態呈圓形、巨噬細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞不增殖。不傳代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 半貼壁半懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中，用吸管吸取PBS，吹洗細胞培養瓶1-2次，收集清洗液。經1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀①。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，收集細胞懸液至離心管中。經1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀②。
4) 吸取5ml新鮮完全培養基，重懸細胞沉淀①、細胞沉淀②,把①、②混勻。
5) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞，按實驗需求接種于實驗器皿內，然后補充適量新鮮的
完全培養基，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6)待細胞狀態穩定后，用于實驗。可以每2-3天換液一次新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
