elisa試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。
  
  用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
  
  間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標記的抗抗體(二抗)以檢測與固相抗原結合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：
  
  1. 將異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原，洗滌除去未結合的抗原及雜質。
  
  2. 加稀釋的樣本，保溫反應。樣本中的異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后，固相載體上只留下異性抗體，樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
  
  3. 加酶標抗抗體。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗抗體結合，從而間接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關。
  
  4. 加底物顯色。
  
  4. 競爭法測抗原。