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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ：人支氣管上皮細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：支氣管組織
產品規格 ：5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人支氣管上皮細胞分離自支氣管組織。支氣管(B ronchi) ，是指由氣管分出的各級分枝，由氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜。后者較粗短，走向較前者略直，所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管。
支氣管和氣管還有以區別就是，氣管是以“C”型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子，從而參與氣道炎癥及免疫反應。
支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發病機制中均起著重要的作用。體外培養的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人支氣管上皮細胞采用鏈霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法結合機械刮刷并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人支氣管上皮細胞經PC K 免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：上皮細胞樣
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
人支氣管上皮細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人支氣管上皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈上皮細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
