胞內勞森菌(Lawsonia intracellularis)是一種細胞內寄生菌,為革蘭氏陰性菌,具有波狀的三層膜作外壁,抗酸,微需氧,嚴格胞內生長,主要寄生在病豬腸粘膜柱狀上皮細胞胞漿中,并在上皮細胞漿中繁殖。胞內勞森菌感染豬會引起豬增生性回腸炎,該病是豬的一種接觸性傳染病,多以病豬的不同程度的出血性、頑固性或間歇性腹瀉,食欲下降,皮膚蒼白,生長速度緩慢等為主要病變特征。胞內勞森菌引發的豬增生性回腸炎對畜牧業產生了巨大的經濟損失,因此快速檢測胞內勞森菌具有重要的意義。本產品就是以探針法qPCR技術為基礎開發的專門檢測胞內勞森菌的試劑盒,它具有下列特點:
規格及成分
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成分 |
規格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色蓋 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍蓋管 |
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胞內勞森菌qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
1.5mL棕色管 |
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胞內勞森菌qPCR陽性對照(1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
1份 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入162uL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品(以10E1-10E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2,1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1×10E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA
低溫運輸,-20℃保存,有效期1年
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