豬瘟病毒疫苗株(Classical Swine Fever Virus-Vaccine,CSFV-Vaccine)屬于黃病毒科瘟病毒屬,為正義單鏈RNA病毒,基因組全長約為12.3 knt。豬瘟病毒疫苗株是弱毒活疫苗,能夠防治豬瘟以控制豬瘟的流行。而對病毒的增殖,特別是弱毒疫苗在原代細胞中的增殖規律還缺乏了解,因此快速檢測豬瘟病毒疫苗株具有重要的意義。為此,本公司以探針法qRT-PCR技術為基礎開發了豬瘟病毒疫苗株的檢測試劑盒,它具有下列特點:
規格及成分
成分
規格
包裝
探針法qRT-PCR緩沖液
500μL
0.5mL藍蓋管
探針法qRT-PCR酶混合液v2
50μL
0.5mL紅蓋管
熒光PCR專用模板稀釋液
1mL
1.5mL綠蓋管
豬瘟病毒疫苗株qRT-PCR引物-探針干粉
50次
0.5mL棕色管
豬瘟病毒疫苗株qRT-PCR陽性對照(1E7拷貝/μL)
50μL
0.5mL黃蓋管
使用手冊
1份
1份
本產品采用五孔盒包裝
注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。
使用方法
稀釋標準曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。如果需要RNA陽性樣品,需要另外訂購。
1. 標記6個離心管,分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
樣品RNA,超純水,核酸純化試劑盒
低溫運輸,-20℃保存,有效期1年
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021-54845833/15800441009
