錦鯉皰疹病毒 (Koi Herpesvirus,KHV)屬于皰疹病毒科鯉皰疹病毒屬,雙鏈DNA病毒, 其基因組大小約為295 kb。錦鯉皰疹病毒基因組主要包括囊膜蛋白基因、衣殼蛋白基因、DNA聚合酶基因(Sph),螺旋酶基因和胸苷激酶基因(TK)等。錦鯉皰疹病毒病是由錦鯉皰疹病毒引起的一種傳染性疾病,該病毒主要感染鯉魚和錦鯉,出現癥狀后24h~48h死亡,病死率高達80%~100%。該病的病理變化主要表現為皮膚上出現白斑和水泡;鰓出血,產生大量粘液或組織壞死等,對水產養殖業造成巨大損失,而TK基因又是錦鯉皰疹病毒重要的基因,因此快速檢測錦鯉皰疹病毒TK基因具有重要的意義。為此,本公司以探針法qPCR技術為基礎開發了錦鯉皰疹病毒TK基因的檢測試劑盒,它具有下列特點:
規格及成分
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成分 |
規格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍蓋管 |
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錦鯉皰疹病毒TK基因qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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錦鯉皰疹病毒TK基因qPCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
1份 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意: 引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA,超純水,核酸純化試劑盒
低溫運輸,-20℃保存,有效期1年
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