芽囊原蟲( Blastocystis Spp.)是一種寄生于人和動物腸道中的原蟲。其曾被認為是對人體無害的腸道酵母菌,后研究發(fā)現(xiàn)是一種寄生于人和其他哺乳動物腸道中的單細胞原生生物。一些人芽囊原蟲感染者無明顯癥狀體征,因此常被忽視。有自覺癥狀者往往無特殊臨床表現(xiàn),易與一般消化系統(tǒng)疾病相混淆,從而漏診或誤診。腹瀉為人芽囊原蟲感染者最常見癥狀,一日數(shù)次至20余次,多為水樣便或糊狀便,也可為黏液樣便。除腹瀉外,感染者的自覺癥狀主要還有腹痛、腹脹、惡心、嘔吐等,而眩暈、無力、發(fā)熱、體重減輕等全身癥狀也可能與人芽囊原蟲的感染有關(guān)。其中個別重癥患者可出現(xiàn)如嚴重腹瀉、低蛋白血癥、全身水腫、缺鐵性貧血等癥狀。因此快速檢測芽囊原蟲具有重要的意義。本產(chǎn)品就是以探針法qPCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測芽囊原蟲通用的試劑盒,它具有下列特點:
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色蓋 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍蓋管 |
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芽囊原蟲通用qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
1.5mL棕色管 |
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芽囊原蟲通用qPCR陽性對照(1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入162uL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品以10E1-10E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2,1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1×10E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA
低溫運輸,-20℃保存,有效期2年
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