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辣椒小果類病毒(Pepper Chat Fruit Viroid，PCFVd)單鏈環狀RNA病毒，基因組長度約為348 nt，GC含量高，內部發生配對形成緊密折疊的桿狀結構。病毒可通過嫁接、芽接、刀具機械傳播，或通過汁液摩擦接種傳播，遠距離通過帶毒種苗調運傳播，導致農作物產量降低且較大影響果實大小，危害農業生產，因此快速檢測辣椒小果類病毒具有重要的意義。為此，本公司以探針法qRT-PCR技術為基礎開發了辣椒小果類病毒的檢測試劑盒，它具有下列特點：
規格及成分
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成分 |
規格 |
包裝 |
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探針法qRT-PCR緩沖液 |
500μL |
0.5mL藍蓋管 |
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探針法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL紅蓋管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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辣椒小果類病毒qRT-PCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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辣椒小果類病毒qRT-PCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意： 引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。如果需要RNA陽性樣品，需要另外訂購。
1. 標記6個離心管，分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
2. 如果陰性對照和陽性對照均正常，則實驗有效，可以進入后續分析。
樣品DNA
低溫運輸，-20℃保存，有效期1年
