發熱伴血小板減少綜合癥(Severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)是由發熱伴血小板減少綜合癥布尼亞病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)感染所致的急性自然疫源性疾病。SFTSV屬于布尼亞病毒科(Bunyaviridae)、白蛉病毒屬(Phlebovirus),其基因組包含三個單股負鏈RNA片段(L、M和S),L、M片段全長分別為6368 nt和3378 nt,S片段是一個雙義RNA,基因組以雙向的方式編碼病毒核蛋白和非結構蛋白。SFTSV病毒感染后,臨床表現以發熱伴血小板減少為主要特癥,少數患者病情較重且發展迅速,可因多臟器功能衰竭而死亡,給人類健康帶來極大威脅。因此檢測SFTSV具有重要的意義。為此本公司以探針法qPCR技術為基礎開發了SFTSV的檢測試劑盒,它具有下列特點:
規格及成分
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成分 |
規格 |
包裝 |
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探針法qRT-PCR緩沖液 |
500μL |
0.5mL藍蓋管 |
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探針法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL紅蓋管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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SFTSV qRT-PCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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SFTSV qRT-PCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
1份 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165uL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。如果需要RNA陽性樣品,需要另外訂購。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2,1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,好用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5μL 1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
樣品RNA
低溫運輸,-20℃保存,有效期2年
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