志賀氏菌(Shigella)又稱為痢疾桿菌,屬于革蘭氏陰性兼性細胞內致病菌,臨床上可引起細菌性痢疾。志賀氏菌屬共有四個種48個血清型,包括痢疾志賀氏菌(Shigella dysenteriae)、福氏志賀氏菌(Shigella flexneri)、宋內氏志賀氏菌(Shigella sonnei)和鮑氏志賀氏菌(Shigella boydii)。宋內氏志賀氏菌常引起痢疾的暴發和流行,給全球人類健康帶來極大的威脅。因此宋內氏志賀氏菌的快速檢測具有重要意義。為此本公司以探針法qPCR技術為基礎開發了宋內氏志賀氏菌的檢測試劑盒,它具有下列特點:
規格及成分
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成分 |
規格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
500μL |
0.5mL本色蓋 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍蓋管 |
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宋內氏志賀氏菌qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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宋內氏志賀氏菌陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
1份 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165uL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2,1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭(下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩混勻1分鐘,得到1E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1E6拷貝/μL的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩混勻1分鐘,得到1E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL的陽性對照(上步所得),充分震蕩混勻1分鐘,得到1E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 依次重復上面的操作得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA
低溫運輸,-20℃保存,有效期2年
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