大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)屬于卵菌綱疫霉屬,是一種專一性較強(qiáng)的植物病原菌,主要侵染大豆。它可在大豆的所有生育期侵染大豆。該菌主要通過游動孢子侵染大豆的根和莖基部,引發(fā)病害。受侵染的大豆植株會出現(xiàn)根部腐爛、莖部壞死、葉片枯萎等癥狀,嚴(yán)重影響大豆的生長和產(chǎn)量。大豆疫霉菌給大豆生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,因此快速檢測大豆疫霉菌具有重要的意義。為此,本公司以探針法qPCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)了大豆疫霉菌的檢測試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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大豆疫霉菌qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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大豆疫霉菌qPCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后得到引物-探針混合液再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA,超純水,核酸純化試劑盒
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期1年
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