產(chǎn)品及特點(diǎn)
細(xì)菌（Bacteria）和真菌（Fungus）是兩類重要的微生物。細(xì)菌是單細(xì)胞生物，個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，沒有成形的細(xì)胞核，屬于原核生物。細(xì)菌形態(tài)多樣，有球狀、桿狀和螺旋狀等。細(xì)菌廣泛分布于自然界，在物質(zhì)循環(huán)、生物共生等方面發(fā)揮著重要作用。但部分細(xì)菌能引起人類和動(dòng)植物的多種疾病。真菌具有真正的細(xì)胞核，屬于真核生物。真菌形態(tài)和大小差異較大，有單細(xì)胞的酵母菌，也有多細(xì)胞的霉菌和大型真菌。真菌在食品加工、釀造、醫(yī)藥生產(chǎn)等領(lǐng)域有重要應(yīng)用，然而也有一些真菌會(huì)引發(fā)人類和動(dòng)植物的感染性疾病。總之，細(xì)菌和真菌在生態(tài)系統(tǒng)和人類生活中既有有益的一面，也可能帶來一定的危害。因此對(duì)細(xì)菌和真菌進(jìn)行快速檢測(cè)具有重要的意義。本產(chǎn)品就是以探針法PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門對(duì)細(xì)菌和真菌進(jìn)行檢測(cè)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，分析靈敏性高，可以達(dá)到100拷貝/反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照，便于排除假陰性結(jié)果。
4. 特異性高，引物是根據(jù)細(xì)菌和真菌DNA高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他生物的DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品只能用于定性分析，不推薦用于定量分析。
6. 細(xì)菌的探針用FAM標(biāo)記，真菌的探針用Cy5標(biāo)記。
7. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的探針法熒光定量PCR反應(yīng)。
8. 本產(chǎn)品只能用于科研。
規(guī)格及成分
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成分
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規(guī)格
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包裝
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2×Probe qPCR MasterMix
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0.5mL
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0.5mL本色蓋
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細(xì)菌和真菌雙重PCR引物-探針干粉
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50次
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1.5mL棕色管
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細(xì)菌PCR陽性對(duì)照(1E4拷貝/μL)
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250μL
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0.5mL黃蓋管
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真菌PCR陽性對(duì)照(1E4拷貝/μL)
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250μL
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0.5mL白蓋管
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使用手冊(cè)
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1份
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無
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝
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注 意：引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入220mL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。
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1. 如果有N個(gè)樣品，好設(shè)置N+3個(gè)提取，多出的一個(gè)是細(xì)菌樣品制備的PC（陽性對(duì)照），一個(gè)是真菌樣品制備的PC，一個(gè)是樣品制備NC（陰性對(duì)照）。可以用10 μL細(xì)菌PCR陽性對(duì)照（1E4拷貝/μL）再加上一定量的水使總體積跟樣本制備試劑盒所要求的起始樣本體積一樣，以此作為細(xì)菌樣品制備PC；可以用10 μL真菌PCR陽性對(duì)照（1E4拷貝/μL）再加上一定量的水使總體積跟樣本制備試劑盒所要求的起始樣本體積一樣，以此作為真菌樣品制備PC。另外用水作為樣品制備NC，水的總體積需要跟樣本制備試劑盒所要求的樣本體積一樣。
2. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)樣品DNA提取試劑盒兼容。也可以選購本公司的免提取核酸釋放劑。
二、Probe qPCR反應(yīng)20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行
做定性分析只做1次重復(fù)，需標(biāo)記N+3+3個(gè)PCR管，其中N+3個(gè)用于上步得到的N+3個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于細(xì)菌PCR陽性對(duì)照，1個(gè)用于真菌PCR陽性對(duì)照。
數(shù)據(jù)處理
1. 如果擴(kuò)增陽性對(duì)照或制備陽性對(duì)照結(jié)果為陰性，則整個(gè)擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無效，不需要分析數(shù)據(jù)，需要重做擴(kuò)增或制備或跟廠家聯(lián)系。如果擴(kuò)增陰性對(duì)照或制備陰性對(duì)照結(jié)果為陽性，說明環(huán)境污染，則整個(gè)擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無效，不需要分析數(shù)據(jù)，需要跟廠家聯(lián)系，購買新的引物和探針。
2. 如果陰性對(duì)照和陽性對(duì)照正常，則實(shí)驗(yàn)有效，可以進(jìn)入后續(xù)分析。
3. 對(duì)定性檢測(cè)，只判斷陽性或陰性，則陰性對(duì)照的Ct必須大于40，或者沒有Ct值。陽性對(duì)照的熒光信號(hào)必須有對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，有典型擴(kuò)增曲線，Ct值應(yīng)該小于40。對(duì)待測(cè)樣品，如果其FAM通道的Ct大于40則為細(xì)菌陰性，如果小于或等于40則為細(xì)菌陽性。如果其Cy5通道的Ct大于40則為真菌陰性，如果小于或等于40則為真菌陽性。
自備試劑
超純水，樣品DNA
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期1年
購物車
幫助
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