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021-54845833/15800441009
乙型肝炎病毒前基因組RNA簡稱HBV pgRNA (Hepatitis B Virus pregenomic RNA，pgRNA)，它是肝細胞內HBV cccDNA轉錄得到的RNA。研究顯示，對治療中的慢性乙型肝炎患者，當病毒的逆轉錄和DNA合成被抑制后，其血清中的HBV RNA水平能反映肝細胞內cccDNA的存在及其轉錄活性，而且還證實了慢性乙型肝炎患者血清中存在的HBV RNA為3.5kb大小的前基因組RNA，這些pgRNA是以HBV RNA病毒樣顆粒形式存在于成熟病毒顆粒的核衣殼內，并和持續的病毒感染及病毒學反彈風險相關，因此快速靈敏診斷乙型肝炎病毒前基因組RNA具有重要意義。本產品以探針法熒光定量RT-PCR技術為基礎開發的專門檢測乙型肝炎病毒前基因組RNA的試劑盒，它具有下列特點：
規格及成分
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成分 |
規格 |
包裝 |
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探針法qRT-PCR緩沖液 |
500μL |
0.5mL藍蓋管 |
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探針法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL紅蓋管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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乙型肝炎病毒前基因組RNA qRT-PCR引物-探針干粉 |
50次 |
1.5mL棕色管 |
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乙型肝炎病毒前基因組RNA RT-PCR陽性對照 (1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意：引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入162μL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品以10E1-10E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2，1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45μL熒光RT-PCR專用模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在6號管中加入5μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在5號管中加入5μL 1×10E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在4號管中加入5μL 1×10E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
自備試劑
樣品RNA
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，有效期1年
