鴨星狀病毒(Duck Astrovirus,DAstV)屬于星狀病毒科中禽星狀病毒屬,為單股正鏈、無囊膜的小RNA病毒。鴨星狀病毒可以通過呼吸道和消化道傳播,且不受季節(jié)影響。鴨星狀病毒的雛鴨發(fā)病率相對較高,但隨著日齡增加,死亡率逐漸降低。成年鴨感染該病毒后通常不發(fā)病,但為病毒攜帶者。當雛鴨感染病毒時,臨床癥狀通常表現(xiàn)為精神萎靡,食欲下降,喜蹲臥,排黃綠色稀便并伴有角弓反張、運動功能障礙等神經(jīng)癥狀,14日齡以內雛鴨感染鴨星狀病毒死亡率可達50%,嚴重威脅我國畜牧業(yè)養(yǎng)殖的發(fā)展,因此快速檢測鴨星狀病毒具有重要的意義。為此,本公司以探針法qRT-PCR技術為基礎開發(fā)了鴨星狀病毒的檢測試劑盒,它具有下列特點:
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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探針法qRT-PCR緩沖液 |
500μL |
0.5mL藍蓋管 |
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探針法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL紅蓋管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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鴨星狀病毒qRT-PCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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鴨星狀病毒qRT-PCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
1份 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標準曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。如果需要RNA陽性樣品,需要另外訂購。
1. 標記6個離心管,分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR專用模板稀釋液,好用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5μL1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
樣品RNA,超純水,核酸純化試劑盒
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為1年
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