耐萬古霉素腸球菌(Vancomycin-Resistant Enterococcus,VRE)又名萬古霉素抗藥性腸球菌,是腸球菌屬下的一種細菌,有著對萬古霉素這種抗生素的抗藥性。腸球菌是一種移生在腸道的革蘭氏陽性球菌,故名腸球菌。在十九世紀末發現,早期歸為鏈球菌屬。在腸球菌屬中,對人類有著病原性的有糞腸球菌(Enterococcus faecalis)及屎腸球菌(Enterococcus faecium)。而所有屎腸球菌更是有著抗藥性的,亦即所有屎腸球菌都是VRE。腸球菌屬的細菌主要是在腸內,亦可以在人類的消化道及尿道內發現。VRE特別對免疫系統受損的人有危險性,但是它令健康的人受感染則較少見。一般來說可以引起心內膜炎、敗血病及尿道感染等病癥。雖然相信有很大比例的雞只帶有VRE,但常見出現接觸的地方仍是在醫院(院內感染)。因此快速檢測耐萬古霉素腸球菌vanA/vanB具有重要的意義。本產品就是以探針法qPCR技術為基礎開發的專門檢測耐萬古霉素腸球菌vanA/vanB的試劑盒,它具有下列特點:
規格及成分
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成分 |
規格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色蓋 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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耐萬古霉素腸球菌vanA/vanB qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
1.5mL棕色管 |
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耐萬古霉素腸球菌vanA qPCR陽性對照(1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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耐萬古霉素腸球菌vanB qPCR陽性對照(1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL白蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入162uL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋耐萬古霉素腸球菌vanA檢測標準曲線樣品 以陽性對照10E1-10E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。
1. 標記6個離心管,分別為A6,A5,A4,A3,A2,A1。
2. 在A1-A6號管中各加入45μL熒光PCR專用模板稀釋液。
3. 在A6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的標準曲線PC樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在A5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在A4號管中加入5 μL 1×10E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E4拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用
6. 重復上面的操作得到A1-A6共六個稀釋度的標準曲線陽性樣品。放冰上待用。
樣品DNA
低溫運輸,-20℃保存,有效期2年
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