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產(chǎn)品中心

最新產(chǎn)品

  • 柯薩奇病毒A6型A10型A16型腸道病毒71型腸道病毒雙管五重探針?lè)╭RT-PCR試劑盒

    規(guī)格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW-E10677
    • 應(yīng)用 : 僅限于科研使用
    • 貨期 : 2年
    • 規(guī)格 :50T
  • 商品詳情
  • 參考文獻(xiàn)
  • 說(shuō)明書下載
  • 商品評(píng)論0
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品及特點(diǎn)

柯薩奇病毒A組(Coxsackievirus A Group,CVA)屬于小RNA病毒科腸道病毒屬,為正義單鏈RNA病毒,基因組全長(zhǎng)約為7400 nt。柯薩奇病毒A組有24 個(gè)血清型,其中,A6型,A10型和A16型的柯薩奇病毒已經(jīng)成為手足口病重要病原體。腸道病毒(Enterovirus)是一類單股正鏈RNA病毒,基因組7200 bp到 8500 bp左右,屬于小顆粒病毒科。它們主要感染人類,引發(fā)手足口病、脊髓灰質(zhì)炎和心肌炎等,給人類的健康造成了極大危害。腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是基因組約為7400 bp的單股正鏈RNA病毒,是引起手足口病的重要病原體之一。還能引起無(wú)菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹等多種與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的疾病。上述病毒給人類的健康造成極大的危害。因此對(duì)其快速檢測(cè)具有重要意義。本產(chǎn)品就是以探針?lè)╭RT-PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的相關(guān)試劑盒,它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,分析靈敏度高,可以達(dá)到100拷貝/反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于排除假陰性結(jié)果。
4. 特異性高,引物和探針?lè)謩e根據(jù)和柯薩奇病毒RNA A6型、A10型和A16型,腸道病毒71型和腸道病毒RNA高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他生物的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 既可用于定性檢測(cè),又可用于定量檢測(cè),但不推薦用于定量。
6. 兩管五重設(shè)計(jì),一管反應(yīng)用于檢測(cè)柯薩奇病毒A6 /A10 /A16型,一管用于檢測(cè)腸道病毒和腸道病毒71型。
7. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的兩管五重探針?lè)≧T-PCR反應(yīng)。
8. 本產(chǎn)品只能用于科研。

規(guī)格及成分

成分

規(guī)格

包裝

探針?lè)?/span>qRT-PCR緩沖液

500μL×2

0.5mL藍(lán)蓋管

探針?lè)?/span>qRT-PCR酶混合液v2

100μL×2

0.5mL紅蓋

熒光PCR專用模板稀釋液

1mL

1.5mL綠蓋

柯薩奇病毒A6型/A10型/A16型三重RT-PCR引物-探針干粉

50次

0.5mL棕色管

柯薩奇病毒A10型陽(yáng)性對(duì)照(1E4拷貝/μL)

50次

0.5mL棕色管

柯薩奇病毒A10型陽(yáng)性對(duì)照(1E4拷貝/μL)

50次

0.5mL棕色管

柯薩奇病毒A16型陽(yáng)性對(duì)照(1E4拷貝/μL)

50μL

0.5 mL黃蓋管

使用手冊(cè)

1份

1份

第一部分,編號(hào)15-15575-5-pt1,10孔盒包裝

成分

規(guī)格

包裝

腸道病毒和腸道病毒71型RT-PCR引物-探針干粉

50次

0.5mL棕色管

腸道病毒71型陽(yáng)性對(duì)照(1E4拷貝/μL)

50μL

0.5mL黃蓋管

腸道病毒陽(yáng)性對(duì)照(1E4拷貝/μL)

50μL

0.5 mL白蓋管

使用手冊(cè)

1份

1份

第二部分,編號(hào)15-15575-5-pt2,5孔盒包裝

意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165mL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。


使用方法

稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品

1. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+6個(gè)提取,多出的一個(gè)是提取陰性對(duì)照,樣本為不含有要檢測(cè)的5種病毒的樣本。多出的另外5個(gè)是分別含有5種病毒之一的提取陽(yáng)性對(duì)照。
2. 用自選方法純化樣品的RNA(含內(nèi)參),本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)RNA提取試劑盒兼容。
設(shè)置兩管5重探針?lè)≧T-PCR反應(yīng)20 μL體系
3. 對(duì)上步提取得到的N+6個(gè)核酸樣本,設(shè)置(N+6)+6個(gè)RT-PCR反應(yīng),多出的6個(gè)中1個(gè)是RT-PCR陰性對(duì)照,另外5個(gè)分別是5種病毒的擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照。

數(shù)據(jù)處理
1. 5個(gè)擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照或5個(gè)樣本制備陽(yáng)性對(duì)照中的任何一個(gè)結(jié)果為陰性(即在其所對(duì)應(yīng)的熒光通道的Ct大于40或沒(méi)有Ct值),則整個(gè)擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析數(shù)據(jù),需要重做擴(kuò)增或制備或跟廠家聯(lián)系。如果任何一個(gè)擴(kuò)增陰性對(duì)照或制備陰性對(duì)照結(jié)果為陽(yáng)性(上表中所用熒光通道任何一個(gè)為陽(yáng)性均算),說(shuō)明環(huán)境污染,則整個(gè)擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析數(shù)據(jù),需要跟廠家聯(lián)系。
2. 如果陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照正常,則實(shí)驗(yàn)有效,可以進(jìn)入后續(xù)分析。
3. 對(duì)第1組樣本,如果FAM通道的Ct大于或等于40則為柯薩奇病毒A6陰性,如果小于或等于40則為陽(yáng)性。如果HEX通道的Ct大于或等于40則為柯薩奇病毒A10陰性,如果小于或等于40則為陽(yáng)性。如果Cy5通道的Ct大于或等于40則為柯薩奇病毒A16陰性,如果小于或等于40則為陽(yáng)性。
4. 對(duì)第2組樣本,如果FAM通道的Ct大于或等于40則為腸道病毒陰性,如果小于或等于40則為陽(yáng)性。如果Cy5通道的Ct大于或等于40則為腸道病毒71型陰性,如果小于或等于40則為陽(yáng)性。

自備試劑
樣品RNA,超純水
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期2年
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