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021-54845833/15800441009
細胞信息
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細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
臍帶 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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細胞形態 |
梭形細胞 |
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細胞簡介 |
臍帶間充質干細胞是一種能分化成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞的多能干細胞。其具有強大的增殖能力，且參與構成造血微環境，因此被廣泛應用于組織工程，細胞治療和基因治療。 人臍帶間質干細胞取自健康足月分娩孕婦的臍帶，其擁有強大的自我更新能力并具有多向分化潛能。 臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化，臍動脈和臍靜脈就發達起來，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發揮積極作用。間充質干細胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞，并具有造血支持、免疫調節、組織修復等作用；目前，多用于風濕免疫疾病的治療。間充質干細胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調節、抗炎和組織修復作用，可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關并發癥。 |
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質量檢測 |
人臍帶間充質干細胞純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
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細胞規格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
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培養基 |
人臍帶間充質干細胞專用培養基 |
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培養條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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傳代特征 |
可傳5代左右；3代以內狀態為佳 |
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傳代方法 |
1:3至1:5，每周2- 3次 |
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細胞貨期 |
現貨 ，1周左右 |
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發貨方式 |
復蘇發貨（免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） |
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供應范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
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特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
細胞培養操作
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收貨處理 |
取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態 |
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復蘇細胞 |
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
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細胞傳代 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。 a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml完全培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。 c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。 |
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細胞凍存 |
1. 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例； 2. a、收集細胞，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。 3. b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。 4. c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
注意事項
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重要提醒 |
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。 2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。 4. 運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 |
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到貨須知 |
1. 收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否完全揮發，細胞是否解凍，若有上述現象發生請及時和我們聯系。 2. 靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照（當天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據)；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。 3. 由于運輸的原因，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現象。個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。 |
售后服務
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細胞予重發 |
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1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發。 |
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2. 收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發。 |
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3. 收到細胞3天內，發現污染問題，經核實后，重發。 |
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4. 常溫發貨細胞靜置2小時后，干冰凍存發貨細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發。 |
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5. 常溫發貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，出現污染經核實后，重發。 |
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6. 細胞活性問題在收到產品3天內提出真實實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發。 |
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細胞不予重發 |
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1. 客戶操作造成細胞污染，不重發。 |
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2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好，不重發。 |
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3. 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發。 |
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4. 細胞狀態不好，未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片，不重發。 |
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5. 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發。 |
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6. 收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發。 |
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特別說明 |
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上海通蔚生物客戶在細胞培養過程中，有任何技術問題可以撥打免費服務電話021-54845833或15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
