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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ： 人髂動脈內皮細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 髂動脈
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人髂動脈內皮細胞分離自髂動脈組織；髂總動脈位于人體的盆腔，人的髂總動脈有兩條，也就是臨床上左右兩條分支，它是由腹部最主要的動脈演化而來，由腹部的腹主動脈沿著人體的脊柱方向向下進行，到達第4腰椎后開始分成兩支，這就是左右髂總動脈。動脈是介于心室與毛細血管之間的管道，它接近心室的部分，管徑大，管壁較厚。經過反復分支，管徑逐漸變小，管壁變薄，最后形成與毛細血管構造相似的毛細血管前小動脈，與毛細血管相接。動脈的管徑大小和管壁的厚薄，雖相差很大，但構造上均有共同之處。
一般均由3層膜組成，最內層稱為內膜，由內皮及縱行排列的結締組織構成；中間的一層稱為中膜，由環形排列的組織構成；最外的一層叫外膜，由縱行排列的結締組織構成。動脈內皮細胞是覆蓋在主動脈內面的單層細胞，可分泌一系列血管活性物質而保持血管穩態，當其受到炎癥或其它因素刺激后穩態被破壞而導致一些心血管疾病的發生。
因此，動脈內皮細胞已成為研究心血管疾病發病機制及治療藥物不可缺少的工具。內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內皮細胞是沿著整個循環系統，由心臟直至最小的微血管。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人髂動脈內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人髂動脈內皮細胞經C D 31免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ： PLL(0.1m g/ml)，明膠(0.1%)
培 養 基 ： 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態 ： 內皮細胞樣
傳代特性 ： 可傳3代左右
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
人髂動脈內皮細胞體外培養周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人髂動脈內皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈內皮細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
