通蔚生物輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒測(cè)定意義介紹

測(cè)定意義：
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NADP+和NADPH含量測(cè)定可以計(jì)算NADP（NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值，其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要標(biāo)志之一，而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。
測(cè)定原理：
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過(guò)PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍(lán)（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測(cè)吸光值，從而測(cè)定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH，從而檢測(cè)NADP+含量。
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
1、如果一次性測(cè)定樣本數(shù)較多，可將試劑一、二、三和四按比例配成混合液。

2、對(duì)照管和測(cè)定管的測(cè)定步驟的區(qū)別：對(duì)照管加完試劑一、二、三、四和五后必須馬上加試劑六；測(cè)定管加完試劑一、二、三、四和五后必須反應(yīng) 20min 后再加試劑六。

3、反應(yīng)過(guò)程中注意避光。
4、若 NADP+測(cè)定中△A（A2-A1）≤0.0144，NADPH 測(cè)定中△A（A2-A1）≤0.0259，說(shuō)明樣本中輔酶含量較低，已低于檢測(cè)限，可做如下調(diào)整：(1)將測(cè)定管避光靜置時(shí)間 20min 延長(zhǎng)到 60min；（2）在提取階段增加取樣量，即取 0.2g 樣本或 0.2mL 樣本加入 1mL 提取液。

5、由于每一個(gè)測(cè)定管需要設(shè)一個(gè)對(duì)照管，本試劑盒 50 管保證測(cè) 24 個(gè) NADP+或 NADPH。

上海通蔚生物一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供的輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù)，滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物科技實(shí)驗(yàn)需求。