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021-54845833/15800441009
簡介
本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術:將捕獲抗體包被于酶標板上，捕獲樣品及標準品中的待測物STATH，清洗后，再加入生物素標記的檢測抗體進行孵育后清洗，形成“捕獲抗體-抗原-檢測抗體”免疫復合物，隨后加入鏈霉親和素偶聯(lián)的辣根過氧化物酶進行孵育，待孵育結束后清洗，接著加入TMB顯色后，若樣本中有待測物則顯藍色，加入終止液停止反應。檢測過程中游離的成分均被洗去，用酶標儀在450 nm處測OD值，顏色的深淺和樣品中的待測物的含量呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣本中STATH的濃度。
樣品收集后若在 1 周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內檢測），或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融，標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
如果洗滌液/稀釋液（20×）有晶體析出，需在37℃下加熱?晶體全部溶解。用蒸餾水1:20稀釋（例如：1mL 濃縮洗滌液加入19mL的蒸餾水）
試劑盒中取出標準品，準備7個試管，先從4μg/mL標準品（200μL）按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至200ng/mL（例：50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液，制備得到1000μL的200ng/mL濃度標準品），隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液，在這6個單獨的試管中將200ng/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度，共配制7個濃度的標準品，依次為: 200ng/mL、 100ng/mL、 50ng/mL、 25ng/mL、 12.5ng/mL、 6.25ng/mL、 3.13ng/mL，從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中，輕輕吹打混勻，以此類推進行標準品的倍比稀釋（如圖所示），1×稀釋液用作零濃度標準品(0ng/mL)。
使用前10分鐘，將100×生物素化抗體于1000×g離心1分鐘，隨后用1×稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成1×生物素化抗體工作液，根據所需用量當日配置當日使用。
使用前10分鐘，將100×SA-HRP溶液于1000×g離心1分鐘，隨后用1×稀釋液將100×SA-HRP稀釋成1×SA-HRP工作液，根據所需用量配置。
備 注：如待測樣本中STATH濃度高于標準品最高值，請根據實際情況選擇適當?shù)南♂尡稊?shù)。
示例數(shù)據
|
標準品濃度(ng/mL) |
200 |
100 |
50 |
25 |
12.5 |
6.25 |
3.13 |
0 |
|
OD值 |
2.470 |
1.642 |
0.903 |
0.605 |
0.45 |
0.223 |
0.154 |
0.075 |
|
校正OD值 |
2.395 |
1.567 |
0.828 |
0.53 |
0.375 |
0.148 |
0.079 |
0 |
下圖所示標準曲線僅供示例，結果計算應以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結果
重復性
使用ELISA試劑盒之前，請您必須完整閱讀說明書，本產品僅供科研使用，不能于臨床診斷或治療。
