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021-54845833/15800441009
產品及特點：
單核細胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)屬乳酸桿菌科，為革蘭氏陽性小桿菌，可以污染食品，導致李斯特病的發病率日趨上升，臨床表現主要有腦膜炎、敗血性肉芽腫、淋巴結腫大等。本病遍及世界各地，是人畜共患的傳染病。人類感染有增多趨勢，特別是新生兒、老年人、孕婦及免疫功能低下者易感性更高。對食品中的單增利斯特菌做出快速的檢測和鑒定，是預防利斯特病的有效方法，因此單核細胞增生李斯特菌的快速準確鑒定對該病的預防和檢疫有著重要作用。
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經過精心優化，專一性強，只擴增單核細胞增生李斯特菌，與其他病原沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照，便于區分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規格及成分：
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編號 |
成分 |
規格 |
|
試劑一 |
PCR MagicMix 3.0 |
1mL（紅蓋） |
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試劑二 |
超純水 |
1mL（亮黃色） |
|
試劑三 |
單核細胞增生李斯特菌PCR引物混合液 |
100μL（白蓋） |
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試劑四 |
單核細胞增生李斯特菌PCR陽性對照1×10E8 /μL |
50μL（黃蓋） |
|
試劑五 |
使用手冊 |
1 份 |
運輸及保存：
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品 DNA。
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品，則需要做N+2個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 單核細胞增生李斯特菌 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系)：
3. 對N+2個樣品，在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照，故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分：
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成份 |
N+2個樣品管 |
PCR陰性對照 |
PCR陽性對照 |
|
PCR Magic Mix 3.0 |
各20μL |
20μL |
20μL |
|
單核細胞增生李斯特菌PCR引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
|
N+2個樣品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
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PCR陰性對照(水) |
-- |
18μL |
-- |
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PCR陽性對照單核細胞增生李斯特菌PCR陽性對照1000倍稀釋液 |
-- |
-- |
18μL |
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過程 |
溫度 |
時間 |
|
預變性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反應35個循環 |
95℃ |
30 sec |
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55℃ |
30 sec |
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72℃ |
40 sec |
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|
最后延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示：
本公司的所有產品，僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
