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人臍帶血造血干細胞
產品簡介
產品名稱 ： 人臍帶血造血干細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 臍帶血
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人臍帶血造血干細胞分離自臍帶血；臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發現，臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統的造血干細胞，可用于造血干細胞移植，因此，臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發揮積極作用。
造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞，最終生成各種血細胞成分，包括紅細胞，白細胞和血小板。造血干細胞需要根據機體的生理需求適時的補充血液系統各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態下，造血干細胞也扮演著調節和維持體內血液系統各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中，造血干細胞移植廣泛應用于血液系統疾病以及自身免疫疾病，在其它實體瘤的治療中，比如淋巴瘤，生殖細胞瘤，乳腺癌，小細胞肺癌，主要應用于常規治療失敗或復發難治以及具有不良預后因素的患者。
造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖，一個干細胞分裂產生兩個子細胞，一個分化為造血祖細胞，另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養產生大量造血祖細胞同時，保持自己既不增殖也不分化。體外培養微環境合適，造血干細胞可持續維持培養 60 天左右。 造血干細胞體外增殖培養需要基質細胞滋養（滋養層細胞），缺少滋養層細胞不增殖，無法長期培養，本產品為收集培養好的造血干懸浮細胞灌裝發貨，不包含滋養層，因此收貨后建議盡快實驗。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人臍帶血造血干細胞采用采集臍帶血、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人臍帶血造血干細胞經C D 34免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ： 含FBS、SC F、IL-3、TPO 、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 懸浮
細胞形態 ： 圓形
傳代特性 ： 不建議傳代
消 化 液 ： 0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
人臍帶血造血干細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人臍帶血造血干細胞是一種懸浮細胞，細胞形態呈圓形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞不建議傳代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.懸浮細胞處理
1）收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中，用PBS清洗細胞培養瓶1-2次，收集清洗液。
2）1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀。
3）加入5ml新鮮完全培養基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞；將分散好的細胞調整合適密度接種至培養器皿中，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4）待細胞狀態穩定后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 復蘇操作說明
1. 準備好37度水浴鍋，預熱至37度。
2. 準備好T25培養瓶，加入10ml完全培養基（培養基量必須大于凍存液10倍體積）。
3. 取出干冰內凍存細胞管，用EP手套包裹凍存管（防止管內進水導致污染），迅速放于水浴鍋內，于1min內融化完全。
4. 取出凍存管，酒精噴灑消毒后擦干，置于超凈臺內。
5. 吸取凍存管內細胞懸液，加入步驟2中準備好的T25培養瓶內，8字緩慢搖勻。
6. 培養瓶放于37度C O 2恒溫培養箱內，靜置培養24h，更換新鮮換培養基（注意貼壁細胞、懸浮細胞不同換液操作方法）。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
特殊注意事項
5. 此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失；懸浮細胞因多數胞體較小，離心收集時，請注意懸液中細胞是否收集完全，可適當加大離心轉速200轉或增加離心時間3-5m in，增加細胞獲取量。為維持細胞干性，發貨細胞瓶內只灌裝1/3-1/2液體，請注意并非漏液。
