購物車
幫助
021-54845833/15800441009
人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）
產品簡介
產品名稱 ： 人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 滑膜組織
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構，各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構，同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎（O A ）以關節軟骨退行性變為特征，其病理改變累及關節的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節的退變。
滑膜細胞是構成滑膜層的最大細胞群體，是維持關節正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C 型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。類風濕關節炎（R A ）是一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為主的系統性疾病。其特征是手、足小關節的多關節、對稱性、侵襲性關節炎癥，經常伴有關節外器官受累及血清類風濕因子陽性，可以導致關節畸形及功能喪失。R A 的發病可能與遺傳、感染、性激素等有關。R A 關節炎的病理主要有滑膜襯里細胞增生、間質大量炎性細胞浸潤，以及微血管的新生、血管翳的形成及軟骨和骨組織的破壞等。
體外培養人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞對于研究類風濕關節炎疾病的發生機理、治療具有重要意義。退行性骨關節病又稱骨關節炎（O A ）、退行性關節炎、老年性關節炎、肥大性關節炎，是一種退行性病變，系由于增齡、肥胖、勞損、創傷、關節先天性異常、關節畸形等諸多因素引起的關節軟骨退化損傷、關節邊緣和軟骨下骨反應性增生。本病多見于中老年人群，好發于負重關節及活動量較多的關節（如，頸椎 、腰椎、膝關節、髖關節等）。過度負重或使用這些關節，均可促進退行性變化的發生。臨床表現為緩慢發展的關節疼痛、壓痛、僵硬、關節腫脹、活動受限和關節畸形等。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ： 含FBS、bFG F、Insulin、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態 ： 成纖維細胞樣
傳代特性 ： 可傳3-5代左右
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）體外培養周期有限；建議使用普諾賽配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳3-5代左右；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1）吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2）添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入3-5ml完全培養基終止消化。
3）用吸管輕輕吹打混勻，調整合適密度按實驗需求接種對應實驗器皿，然后按器皿大小
補充適當新鮮的完全培養基，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4）待細胞完全貼壁后，培養觀察，用于實驗；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 復蘇操作說明
1. 準備好37度水浴鍋，預熱至37度。
2. 準備好T25培養瓶，加入10ml完全培養基（培養基量必須大于凍存液10倍體積）。
3. 取出干冰內凍存細胞管，用EP手套包裹凍存管（防止管內進水導致污染），迅速放于水浴鍋內，于1min內融化完全。
4. 取出凍存管，酒精噴灑消毒后擦干，置于超凈臺內。
5. 吸取凍存管內細胞懸液，加入步驟2中準備好的T25培養瓶內，8字緩慢搖勻。
6. 培養瓶放于37度C O 2恒溫培養箱內，靜置培養24h，更換新鮮換培養基（注意貼壁細胞、懸浮細胞不同換液操作方法）。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
