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021-54845833/15800441009
兔尿道平滑肌細胞
產品簡介
產品名稱 ： 兔尿道平滑肌細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 尿道組織
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
兔尿道平滑肌細胞分離自尿道管組織；尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內口，止于尿道外口，行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部，尿道在尿道膜部有一環橫行紋肌構成的括約肌，稱為尿道外括約肌，由意識控制。尿道有三個解剖上的較狹部和膨大部，前者分別位于外口、膜部和內口，后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。
在前尿道的外面，還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部)，一部分為多列或復層柱狀上皮，在有尿道海綿體的一部分尿道，主要為復層柱狀上皮，在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內有許多環狀細胞，舟狀窩的遠端部開始有未角化的復層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應豐富，主要為結締組織。肌肉層有縱行肌和外環形肌。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的兔尿道平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過平滑肌細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的兔尿道平滑肌細胞經α-SM A 免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ： 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態 ： 成纖維細胞樣
傳代特性 ： 可傳3-5代左右
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
兔尿道平滑肌細胞體外培養周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
兔尿道平滑肌細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳3-5代左右；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4)待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
