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021-54845833/15800441009
產(chǎn)品名稱 : Nb2-11大鼠淋巴瘤細(xì)胞
產(chǎn)品貨號 : Nb211
中文名稱 : 大鼠淋巴瘤細(xì)胞 基本形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
培養(yǎng)環(huán)境 : 37℃，5%CO2，95%AIR
生長特性 : 懸浮
培養(yǎng)條件 : RPMI-1640+10% FBS+10% HS+1% P/S
細(xì)胞復(fù)蘇
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀用 5-8ml 完全培養(yǎng)基重懸，接種 T25 培養(yǎng)瓶，于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min。
3、棄上清，沉淀細(xì)胞用 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個 T25）， 補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min。
3、棄上清，沉淀細(xì)胞每100萬加入1mL凍存液，混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞用程序降溫盒放入－80℃冰箱即可；如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，需在-80℃冰箱存放24小時以上。
中文名稱 : 大鼠淋巴瘤細(xì)胞 基本形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
培養(yǎng)環(huán)境 : 37℃，5%CO2，95%AIR
生長特性 : 懸浮
培養(yǎng)條件 : RPMI-1640+10% FBS+10% HS+1% P/S
細(xì)胞復(fù)蘇
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀用 5-8ml 完全培養(yǎng)基重懸，接種 T25 培養(yǎng)瓶，于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min。
3、棄上清，沉淀細(xì)胞用 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個 T25）， 補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min。
3、棄上清，沉淀細(xì)胞每100萬加入1mL凍存液，混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞用程序降溫盒放入－80℃冰箱即可；如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，需在-80℃冰箱存放24小時以上。
