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021-54845833/15800441009
基本信息
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細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
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細胞規格 |
1×10?cells/T25培養瓶 |
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細胞英文 |
HC-OA細胞 |
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細胞簡介 |
HC-OA來源于OA供體的人關節軟骨。骨關節炎是一種炎癥性疾病，其特征是由于降解細胞外基質的酶的過度分泌而導致關節軟骨組織降解加劇。盡管軟骨細胞開始增殖和活化，但它們無法有效修復降解的軟骨。相反，軟骨細胞經歷終末分化并最終凋亡，導致軟骨礦化過程類似于發育過程中的骨形成。因此，HC-OA為研究OA關節異常環境下軟骨細胞生物學變化提供了一個有用的模型。 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
關節軟骨 |
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細胞形態 |
成纖維細胞樣 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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培 養 基 |
RPMI-1640，90%；FBS，10% |
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生長條件 |
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37℃ |
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傳代方法 |
1：3至1：6，每周2次 |
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凍存條件 |
90%完全培養基+10% DMSO，液氮儲存 |
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支原體檢測 |
熒光法（-） |
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發貨方式 |
快遞運輸(特殊情況的另處理) |
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供應范圍 |
僅限于科研實驗使用，不得用于其它用途 |
接受后處理
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處理1 |
收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們 |
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處理2 |
請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h |
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處理3 |
棄去T25瓶中的培養基，添加6ml本公司附帶的完全培養基 |
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處理4 |
如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司的完全培養基 |
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處理5 |
接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系 |
細胞操作
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復蘇細胞 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
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細胞傳代 |
如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養: |
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1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 |
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2. 加 1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 |
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3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。 |
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4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
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細胞凍存 |
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類: |
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1. 棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入1ml 胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 |
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2. 4 min 1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。 |
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3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
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注意事項 |
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。 |
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2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。 |
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3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。 |
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4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留6~8mL 維持細胞正常培養，待細胞匯合度80%左右時正常傳代。 |
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5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養，培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。 |
售后服務
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細胞予重發 |
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1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發。 |
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2. 收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發。 |
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3. 收到細胞3天內，發現污染問題，經核實后，重發。 |
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4. 常溫發貨細胞靜置2小時后，干冰凍存發貨細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發。 |
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5. 常溫發貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，出現污染經核實后，重發。 |
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6. 細胞活性問題在收到產品3天內提出真實實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發。 |
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細胞不予重發 |
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1. 客戶操作造成細胞污染，不重發。 |
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2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好，不重發。 |
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3. 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發。 |
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4. 細胞狀態不好，未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片，不重發。 |
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5. 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發。 |
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6. 收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發。 |
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特別說明 |
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上海通蔚生物客戶在細胞培養過程中，有任何技術問題可以撥打免費服務電話021-54845833或15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
