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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ：小鼠小梁網細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：眼球
產品規格 ：5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
小鼠小梁網細胞分離自眼球組織。小梁網由角膜基質纖維、后界膜和角膜內皮向后擴展而成，覆蓋在鞏膜靜脈竇的內側。小梁網細胞在眼內壓調節中起著關鍵作用。小梁網細胞內有特定的神經遞質和神經肽受體，其中包括腎上腺素、乙酰膽堿和神經肽Y。
青光眼是由于眼內壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病，小梁網細胞的體外培養是青光眼病因學研究的重要手段之一。
在小梁網細胞中，一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發細胞內信號傳導機制，小梁網細胞可合成不同類型的細胞外基質蛋白以及金屬蛋白酶。
形態學觀察可見，剛從組織塊長出的原代細胞，形態各異，多數呈星狀或不規則形。細胞有胞突，核橢圓形，胞體肥大，胞漿豐富，且可見吞噬顆粒。
隨著細胞的增生及相互融合為單層，細胞的形態趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失，排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規則形。胞體透亮，包膜清晰。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠小梁網細胞采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠小梁網細胞經N SE (神經元特異性烯醇化酶) 免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ：PLL(0.1m g/ml)
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：梭形、多角形
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ：氣相：空氣，95% ；C O2，5%
小鼠小梁網細胞體外培養周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
小鼠小梁網細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈梭形、多角形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
