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021-54845833/15800441009
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本試劑盒是以過碘酸鹽活化辣根過氧化物酶（HRP），活化的過氧化物酶通過席夫堿與抗體或蛋白上的伯胺交聯，再還原席夫堿產生穩定的偶聯產物。 |
特點
1. 可偶聯0.75-3mg的抗體或蛋白，最佳的偶聯量為1mg。
2. 經透析和濃縮提高偶聯效率和產物純度。
1. 取500 μl HRP溶液于5 ml離心管中，加入200 μl HRP活化緩沖液，在旋轉混懸儀上，室溫緩慢反應30分鐘。
2. 加入200 μl HRP偶聯緩沖液，靜置30分鐘，溶液緩慢變回棕黃色。
3. 加入1 mg需偶聯的目的蛋白（體積控制在1 ml左右），用移液器輕輕混勻后，將液體轉移到透析袋中，先用透析夾固定透析袋的一端，裝入液體后再固定另一端，最后將透析袋置于2 L偶聯透析液中，將裝有透析液的容器置于磁力攪拌器上室溫透析2小時，或4℃透析過夜。
4. 透析后，將透析袋中液體轉移到5 ml離心管中，加入100 μl還原劑，室溫靜置2小時，間隔半小時用移液器輕輕混勻2-3次。至此偶聯實驗已完成。
5. 如果需要高濃度的偶聯產物，將第4步液體轉移到透析袋中，直接覆蓋濃縮劑，一般濃縮10分鐘至半小時，也可根據實際需求調整濃縮時間。
HRP，HRP活化緩沖液，HRP偶聯緩沖液，偶聯透析液，還原劑，透析袋，透析夾，濃縮劑（選用）
使用說明
組份
